Cerebrospinālā šķidruma (CSF) analīze ir spēcīgs instruments, lai uzlabotu dažādu centrālajā nervu sistēmā notiekošo procesu noteikšanu, piemēram, asiņošanu, iekaisumu, infekciju, audzēju un citus klīniskus stāvokļus. Turklāt CSF savienojumu sērijveida novērtējumi (piemēram, hormoni, zāles, neirotransmiteri, biomarķieri, metabolīti un vīrusi) ir vienlīdz svarīgi gan fundamentālajos, gan translācijas pētījumos. CSF tilpums centrālajā nervu sistēmā tiek uzturēts stabils, pateicoties sekrēcijai un absorbcijai.
I. Darbības apsvērumi
CSF parasti tiek savākts, izmantojot smadzeņu kambara vai jostas punkciju. Lumbālpunkcija rada salīdzinoši mazāku komplikāciju risku primātiem, kas nav cilvēkveidīgie primāti, jo lielākajai daļai sugu lumbālpunkcija atrodas tālu no muguras smadzeņu gala. Ir nepieciešama atbilstoša anestēzija un aseptiskas metodes, tostarp vietas sagatavošana, piemēram, skūšanās, un sterilu materiālu izmantošana. Jāizmanto vismaz sterili cimdi, šļirces un adatas, ņemot vērā sterilus ķirurģiskos pārklājus. CSF savākšana parasti tiek veikta sānu guļus stāvoklī, krūšu kurvja guļus stāvoklī vai sēdus stāvoklī, uzlabojot piekļuvi smadzeņu kambariem vai paplašinot starpskriemeļu telpu, saliekot kaklu vai mugurkaulu. Izvēlētās adatas izmēram un garumam ir jāatbilst primātu, kas nav cilvēkveidīgie primāti, sugai un izmēram. Procedūras laikā izmantotās metodes, aprīkojums, palīgmateriāli un perioperatīvā aprūpe atšķiras atkarībā no sugas, pētījuma mērķiem un klīniskā veterinārārsta vēlmēm.
Dažos pētījumu protokolos var būt nepieciešama nepārtraukta CSF savākšana laika gaitā vai CSF paraugu ņemšana no subjektiem, kuriem nav anestēzijas. Šiem protokoliem nepārtrauktu CSF savākšanu no nomodā esošajiem rēzus pērtiķiem var panākt, izmantojot ilgstoši implantētus CSF katetri, kas savienoti ar zemādas savākšanas portiem.
Autore ir pielikusi visas pūles, lai atrastu jaunākās atsauces par kopējo CSF apjomu, ierobežojumiem vai ieteikumiem durālām punkcijām, savākšanas biežumu, drošu izņemšanas apjomu un CSF papildināšanas ātrumu. Literatūra par šo aspektu ir ierobežota lielākajai daļai primātu, kas nav cilvēkveidīgie primāti. Turklāt savākšanas metodes atšķiras, jo Cilvēku primātu veterinārārstu asociācijas biedru aptaujas liecina, ka dažādas iestādes veiksmīgi izmanto dažādas metodes CSF savākšanai. Tāpēc autors sniedz apsvērumus un ieteikumus CSF savākšanai, pamatojoties uz esošajiem labākajiem pierādījumiem.
Atsauces nolūkā iepriekšējos pētījumos ir noteikts, ka šķietamais CSF tilpums pieaugušiem rēzus pērtiķu tēviņiem (8,0-10,6 kg) ir 10+/-0,06 ml ar CSF plūsmas ātrumu 0.018+/-0,003 ml/min. CSF veidošanās ātrums rēzus pērtiķiem svārstās no 28,6 līdz 44,2 μL/min. Šajā jomā ir nepieciešami turpmāki pētījumi par primātiem, kas nav cilvēkveidīgie primāti, lai veicinātu pamācošāku ieteikumu izstrādi.
II. Iespējamās nevēlamās reakcijas
Lai gan komplikācijas CSF savākšanas laikā primātiem, kas nav cilvēkveidīgie primāti, ir reti, anatomiskas atšķirības un nepareizas vai neatbilstošas tehniskās metodes var izraisīt parauga bojājumus vai komplikācijas, piemēram, asiņošanu, trūci, infekciju, smadzeņu stumbra, muguras smadzeņu vai nervu sakņu bojājumus un diskomfortu dzīvniekiem. Lai gan šīs komplikācijas ir reti sastopamas, tās var apdraudēt dzīvnieku labturību.
Ar to saistīto risku dēļ CSF ir jāsavāc veterinārārstam vai apmācītam veterinārajam personālam. Neveiksmīgiem CSF savākšanas mēģinājumiem prakse var atšķirties. Ir ierasta prakse vienam indivīdam atļaut līdz trim neveiksmīgiem mēģinājumiem. Pēc trešā neveiksmīgā mēģinājuma vadība jāpārņem citai kvalificētai personai. Ja otrais indivīds nespēj savākt CSF pēc trim mēģinājumiem, mēģinājumi jāpārtrauc. Tikmēr dzīvnieks saņems atbilstošu pretsāpju ārstēšanu un atveseļosies pēc anestēzijas. Savākšanas vietas maiņa (piemēram, no smadzeņu kambariem uz jostasvietu) pēc neveiksmīgiem mēģinājumiem bieži vien rada panākumus. Ja rodas neveiksmīgs mēģinājums bez attēlveidošanas vadības, var izmantot adatas ievietošanu ar fluoroskopijas{9}} palīdzību. Attēlu vadība ne tikai palielina panākumu līmeni, bet arī var samazināt traumatisku punkciju biežumu.
Pēcoperācijas uzraudzība jāturpina, līdz dzīvnieks atgriežas savā būrī un var uzturēt vertikālu stāju bez atbalsta. Dzīvnieku uzraudzībai jāilgst vismaz 24 stundas vai saskaņā ar Institucionālās dzīvnieku aprūpes un lietošanas komitejas (IACUC) apstiprināto protokolu. Uzraudzībai jāietver pamata fizioloģisko, uzvedības un lokomotoro parametru novērtējums. Īpaši jānovērtē neiroloģiskās disfunkcijas pazīmes, tostarp, bet ne tikai, letarģija, depresija, koma un galvas nospiešanas pazīmes. Galvassāpes un sekojoša intrakraniāla hipotensija pēc CSF savākšanas nav nekas neparasts cilvēku medicīnā. Ņemot vērā šo iespējamo komplikāciju primātiem, kas nav cilvēkveidīgie primāti, operācijas laikā ir jānodrošina pretsāpju ārstēšana un jāturpina 2–3 dienas pēc operācijas vai pēc vajadzības, pamatojoties uz pēcoperācijas novērojumiem saistībā ar uzvedību, kas saistīta ar galvassāpēm vai mugurkaula sāpēm. Visefektīvākā pretsāpju shēma var ietvert visaptverošu ārstēšanu, kas uzsākta pirms operācijas.
III. IACUC apsvērumi un uzskaite
IACUC vajadzētu iepazīties ar procedūrām, kas saistītas ar CSF savākšanu un visām iespējamām komplikācijām, un tās jāpārskata vismaz reizi gadā. Visa attiecīgā informācija, piemēram, zāļu devas, preparāti pirms operācijas, savāktie CSF apjomi, savākšanas biežums un īstermiņa-un ilgtermiņa-pēcoperācijas atveseļošanās, ir jāapraksta IACUC protokolā un attiecīgi jādokumentē medicīniskajos ierakstos vai laboratorijas žurnālos.
Lai gan CSF var būt izšķiroši dati pētniecības protokolos, nepareizas savākšanas metodes var ietekmēt dzīvnieku labturību. Iesniedzot protokolus, jāsniedz zinātnisks pamatojums par kolekciju skaitu un biežumu. Konkrēti, IACUC rūpīgi jāizvērtē katrs priekšlikums, kas saistīts ar CSF savākšanu, un jāņem vērā:
1.Vai CSF savākšana ir būtiska, lai sasniegtu protokolā izklāstītos zinātniskos mērķus?
2. Vai ir pieejamas alternatīvas metodes un mazāk invazīvas centrālās nervu sistēmas novērtēšanas metodes (piemēram, attēlveidošanas metodes), un, ja ir, vai tās ir ņemtas vērā?
3.Vai operatori ir saņēmuši atbilstošu apmācību un vai viņiem ir pietiekamas prasmes?
4.Vai tiks nodrošinātas atbilstošas perioperatīvās anestēzijas un pretsāpju shēmas? Par anestēzijas un pretsāpju līdzekļu plāniem jākonsultējas ar laboratorijas dzīvnieku veterinārārstiem.
5. Vai savāktajā CSF apjomā ir ņemts vērā dzīvnieka vecums un izmērs?
6. Vai durālo punkciju skaits un biežums ir piemērots dzīvniekam un vai ir samazināts komplikāciju risks? Ja pētījumā ir iekļautas vairākas CSF savākšanas, jānorāda maksimālais savākšanas laiks katram dzīvniekam.
7.Vai pēcoperācijas novērošanas plāns ir atbilstošs?
8. Vai ir apsvērtas visas iespējamās pēcoperācijas komplikācijas un uzskaitītas visas saprātīgās iejaukšanās, tostarp eitanāzija?
